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IP01 的 11 个组件:一套盒子装下整个 Co-IP 流程

分子互作富集试剂盒 · 产品选型 · 蛋白质互作 IP

从基因序列到互作蛋白:IP01/IP02 把质谱级 Co-IP 做成了成品试剂盒

3×FLAG 标签体系 · 7 种规格/组合 · 市场同类成品稀缺

传统 Co-IP 的做法是:自己构建带标签的载体、自己买磁珠、自己配裂解液和洗液、自己摸洗脱条件。每一步都能做,但每一步都可能让末端的质谱结果不可用。IP01 把这些步骤收进一个盒子,输入是 Bait 的编码序列,输出是可直接上机的质谱级互作蛋白样本。

7 种
规格/组合
3×FLAG
标签体系
2/3/6
Tests 三档
2 个
对照体系
质谱级
样本标准
3-5天
货期

一、盒子里到底装了什么

IP01 分 PART A 与 PART B,共 11 个组件。拆开看,正好对应 Co-IP 的每一个易错点:

组件作用对应解决的坑
细胞裂解液温和裂解,保留互作裂解过猛 → 互作丢失
Wash buffer A / B两段梯度洗涤洗不干净 → 背景高
Anti-FLAG 磁珠捕获带标签 Bait磁珠批次差异
洗脱肽(冻干粉)温和洗脱强酸洗脱 → 蛋白变性
PC 细胞裂解液阳性对照没有对照 → 无法判断富集是否成功
Anti-FLAG-HRP富集效果验证不做验证 → 直接浪费机时
磁控珠 / 磁力架 / 浓缩柱流程配套器材不匹配 → 样本损失
磁珠法富集操作

磁珠捕获、洗涤、洗脱,三步都在盒子里

规格按 Tests 分三档:IP01A 2 Tests、IP01B 3 Tests、IP01C 6 Tests。裂解液、磁珠、洗脱肽的装量随 Tests 同步放大,不是简单加倍。

二、IP02 多出来的那一步,是"能比较"

IP01 下游用 LFQ/iBAQ 定量,能回答"哪些蛋白跟 Bait 一起被拉下来"。但它回答不了"结合强度变了没有"。IP02 把 SILAC 培养基与 IP01 组合,制备 SILAC-IP 样本,同一张谱里同时比较两组样本的结合差异,既能锁定特异性互作,也能搭出互作网络。

组合培养基IP 部分适用
IP02ASIP05/SIP06 K8R10IP01A 2 Tests两组样本,标准型
IP02A (Elite)SIP11/SIP12 L3IP01A 2 Tests两组样本,经济型
IP02BSIP15/SIP16 3-plexIP01B 3 Tests三组样本,标准型
IP02B (Elite)SIP17/SIP18 3-plex EliteIP01B 3 Tests三组样本,经济型
免疫共沉淀样本的凝胶检测

富集是否成功,先看胶,再决定要不要上机

三、为什么"自己做"经常做不出来

质谱级 Co-IP 的失败,很少是某一个试剂的问题,而是匹配问题:裂解液强度、洗液盐浓度、磁珠载量、洗脱方式,这四项只要有一项偏离,结果就是"有条带但背景一片"。试剂盒的核心价值是把这四项固定成一套经过验证的组合。

IP 富集样本的 SDS-PAGE 检测

厂家 DEMO 数据中的 IP 富集胶图,用于判断富集效率

四、上手难度:新手能不能跑

厂家在资料里明确写了"试剂盒技术流程已高度优化,新手可完全驾驭"。这句话的实际含义是:流程被压缩成按步加液、按步洗涤、按步洗脱,不需要自己算缓冲液配方。对没有质谱经验的分子生物学实验室,这一点比参数更重要。

适合先试的场景
手上已有带 FLAG 标签的 Bait 构建、想在一个月内拿到互作候选名单的课题组,用 IP01 跑一轮 DEMO 流程,比从零搭体系更可控。

先把实验目标说清楚,再谈选型

告诉我 Bait 蛋白名称、标签类型、样本物种、是否需要定量比较,可以给出 IP01 或 IP02 的具体规格建议。

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小分子与蛋白互作概念图

互作发现的目标,是把网络画出来,而不是拿到一条条带

成套试剂盒与耗材

裂解、洗液、磁珠、洗脱肽全部在盒内

on-beads 酶解验证胶图

DEMO 数据:富集后可直接在磁珠上酶解

锲诺医药 · 质谱级一站式分子互作富集试剂盒

SILAC 标记 · IP/Co-IP · 小分子靶点 PD · 质谱前处理 · IP 系列

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产品参数来自厂家公开技术资料,具体规格与价格以当期报价单为准

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